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更新時(shí)間:2025-02-10
所有產(chǎn)品僅供科研使用,不能用于食用和醫(yī)療等
SDS-PAGE凝膠配制試劑盒
操作步驟:
1.灌制分離膠
(1)參照凝膠模具說(shuō)明書,裝配好凝膠模具。
(2)將不同體積的30%Acr-Bis(29:1)、分離膠緩沖液和雙蒸水在小燒杯中混合。
(3)加入10%APS和TEMED,輕輕攪拌混勻,避免產(chǎn)生氣泡。
(4)將分離膠溶液灌入凝膠玻璃槽中,然后在分離膠溶液上輕輕覆蓋一層1-3cm的水層,用于壓平液面。
(5)靜置30-60min,至分離膠凝固。
2.灌制濃縮膠
(1)去除覆蓋在分離膠上的水層,并用濾紙吸干,水份吸不干,可能會(huì)導(dǎo)致濃縮膠和分離膠分開。
(2)將不同體積的30%Acr-Bis(29:1)、分離膠緩沖液和雙蒸水在小燒杯中混合。
(3)加入10%APS和TEMED,輕輕攪拌混勻,避免產(chǎn)生氣泡。
(4)將濃縮膠溶液加至分離膠的上面,插入樣品梳,避免產(chǎn)生氣泡,靜置20-30min,直至濃縮膠聚合。
(5)待凝膠聚合后,小心拔下梳子,以免破壞加樣孔。
(6)進(jìn)行常規(guī)電泳。
注意事項(xiàng):
1.10%APS配置好后,應(yīng)當(dāng)-20℃保存,并且應(yīng)盡量減少室溫存放時(shí)間,以防失效。
2.TEMED易揮發(fā),使用后請(qǐng)擰緊瓶蓋。
3.凝膠凝聚的速度與溫度等關(guān)系密切,可通過(guò)調(diào)節(jié)APS和TEMED的用量,控制凝膠的聚合速度,凝膠聚合過(guò)快不利于操作。
4.丙烯酰胺,TEMED等有毒,操作時(shí)請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴手套。
5.在凝膠配制過(guò)程中,應(yīng)盡量避免產(chǎn)生氣泡。
6.在分離膠上層加蒸餾水時(shí)要小心操作,加水時(shí)速度不宜過(guò)快。
SDS-PAGE凝膠配制試劑盒