前列腺特異抗原(PSA)放免檢測，PSA放免實(shí)驗(yàn)代測

信帆生物供應(yīng)前列腺特異抗原(PSA)放免試劑盒，提供PSA放免實(shí)驗(yàn)檢測服務(wù)。

前列腺特異抗原（prostate  specific  antigen，PSA）是一種由前列腺上皮細(xì)胞分泌的糖蛋白，有*的組織特異性，分子量為33000，含糖量為7%，由240個(gè)氨基酸組成，屬于糖基化的單鏈肽。PSA僅存在于前列腺上皮細(xì)胞的胞質(zhì)、導(dǎo)管上皮和粘液內(nèi)，具有糜蛋白酶樣和胰蛋白酶的活性，在前列腺癌診斷中是一種重要的腫瘤標(biāo)志物，比前列腺酸性磷酸酶（PAP）有更大的特異性和靈敏度。

本試劑盒用于定量測定人血清中前列腺特異抗原（PSA）的含量。PSA在前列腺癌的診斷、病情觀察和有無轉(zhuǎn)移灶的判斷上是一種重要的觀察指標(biāo) ，此項(xiàng)指標(biāo)已被廣泛用于男性體檢，以達(dá)到對前列腺癌的早期診斷、早期治療的目的。

本試劑盒采用雙抗體夾心法。使用2株抗PSA單克隆抗體，用其中一株單抗包被聚苯乙烯試管，在包被管中分別加入標(biāo)準(zhǔn)品或血清樣品后，再加入¹²⁵I標(biāo)記的另一株P(guān)SA單克隆抗體，溫育后即形成固相抗體-抗原-¹²⁵I標(biāo)記抗體復(fù)合物。洗滌后測定每管CPM值，其強(qiáng)度與PSA濃度成正比。以各標(biāo)準(zhǔn)品濃度的對數(shù)和各標(biāo)準(zhǔn)品CPM值的對數(shù)作線性擬和，得出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式，將樣品CPM值代入方程式就可計(jì)算出樣品中PSA濃度。

【樣本要求】

病人標(biāo)本無須特殊處理，采取正確醫(yī)用技術(shù)取靜脈血，分離血清待測。如五天內(nèi)檢測，血清可存放于2-8℃冰箱，否則需將血清樣本密封后，置-20℃以下凍存，保存期不超過三個(gè)月，避免反復(fù)凍融。采血前兩周內(nèi)嚴(yán)禁前列腺及前列腺指檢、前列腺穿刺、尿道器械穿刺等檢查，以免導(dǎo)致血清PSA升高。

【試驗(yàn)方法】

• 準(zhǔn)備：取出試劑盒和血清樣品，室溫平衡15—30分鐘。
• 往PSA包被管中加入100μl標(biāo)準(zhǔn)品、質(zhì)控或樣品，建議標(biāo)準(zhǔn)品加雙孔。每孔分別加入¹²⁵I 標(biāo)記物200μl。充分混勻。
• 置37℃溫育2小時(shí)。
• 溫育完畢抽凈反應(yīng)液并用蒸餾水洗滌，如此重復(fù)4-5次，后一次盡量將管內(nèi)殘留液體抽干。
• 操作步驟

取PSA包被管若干，用記號筆或特殊鉛筆編號T、S₀~S₅和待測樣品管等，然后用微量加樣器按下表加樣。加樣前所有試劑包括血清樣品好平衡到室溫。

【數(shù)據(jù)處理】

聯(lián)機(jī)處理

由電腦自動(dòng)處理得出結(jié)果。建議用戶使用log-log數(shù)據(jù)處理模式。

計(jì)算器處理：使用有線性擬合功能的計(jì)算器，可以比較方便地計(jì)算出樣品濃度值，具體操作方法請查閱計(jì)算器的使用說明書。

【對試驗(yàn)結(jié)果的解釋】

1．試驗(yàn)結(jié)果質(zhì)量控制：

0.5ng/mL～64ng/mL濃度范圍內(nèi)用log-log方程擬合，劑量-反應(yīng)曲線相關(guān)系數(shù)不低于0.9900；

質(zhì)控血清測定值應(yīng)在允許范圍內(nèi)。

如果標(biāo)準(zhǔn)曲線相關(guān)系數(shù)低于0.9900或者質(zhì)控血清測定值不在允許范圍內(nèi)，則本次試驗(yàn)視為無效，應(yīng)重新進(jìn)行檢測。

2．正常參考值：＜4ng/ml

由于地區(qū)不同，使用的儀器不同，所測正常值存在一定差異，因此本說明書所提供的正常值僅作參考，各實(shí)驗(yàn)室應(yīng)根據(jù)病人群

體建立自己的正常值范圍。另外，正常人PSA的含量隨著年齡的增加有所提高，應(yīng)注意受檢者年齡情況。

3．據(jù)報(bào)道血清PSA定量的陽性臨界值為大于10ng/m時(shí)，前列腺癌的診斷特異性達(dá)90％-97％。近的實(shí)驗(yàn)表明，在前列腺癌中游離PSA/總PSA比正常情況下要低。一般認(rèn)為F/T（f-PSA/t-PSA）臨界值為0.20，在0.20以下均需考慮前列腺癌的問題。PSA在4-10ng/ml時(shí)，F(xiàn)/T比值可在良性和惡性前列腺疾病中發(fā)生顯著的變化，測定f-PSA并結(jié)合其他檢查能夠提高前列腺癌檢測的特異性，而不降低其靈敏度。良性前列腺增生、前列腺炎、腎臟和泌尿生殖系統(tǒng)疾病，血清PSA水平也可升高，也應(yīng)進(jìn)行其他必要的檢查加以甄別。約有5％的前列腺癌患者，前列腺酸性磷酸酶（PAP）升高，但PSA在正常水平。此外研究者認(rèn)為PSA檢查值為2.0~4.0 ng/ml的人是患前列腺癌的高危人群，應(yīng)每年檢查一次。

4．CA19-9、CA125、CEA、高血脂、高膽紅素、高血紅蛋白等對本藥盒樣品測定的影響：試驗(yàn)證明，CA19-9、CA125、CEA、高血脂、高膽紅素、高血紅蛋白等對測定沒有明顯的影響。

【該試驗(yàn)方法的局限性】

本試劑盒測定范圍為0.3～100ng/mL。超出試劑盒測定范圍的測定結(jié)果是通過標(biāo)準(zhǔn)品曲線外延得出的計(jì)算結(jié)果，不作為準(zhǔn)確定量數(shù)據(jù)。

【產(chǎn)品性能指標(biāo)】

1．測定范圍：0.3-100ng/ml

2．靈敏度：≤0.1ng/ml

3．標(biāo)準(zhǔn)曲線相關(guān)系數(shù)：≥0.9900

4．分析內(nèi)變異系數(shù)：CV≤10.00%；分析間變異系數(shù)：CV≤15.00%

5．質(zhì)控血清的測定值：在給定范圍內(nèi)。

【注意事項(xiàng)】

• 本藥盒及其成分應(yīng)于2-8℃保存，使用前應(yīng)平衡至室溫，加試劑前必須搖勻。
• 操作前請仔細(xì)閱讀說明書，不同批號的試劑不得混用。
• 包被管需密封防潮，包被管打開后，剩余包被管應(yīng)裝入

袋中密封保存，以免受潮。

• 加樣操作應(yīng)快速準(zhǔn)確手法一致，盡量縮短整個(gè)加樣時(shí)間。嚴(yán)格控制每步反應(yīng)的時(shí)間和溫度。
• 加樣頭不可混用，以免交叉污染。
• 加標(biāo)準(zhǔn)品、質(zhì)控或樣品時(shí)注意將樣本加到試管底部；加標(biāo)記物時(shí)加樣頭不要碰到液面。
• 溫育之前應(yīng)充分混合均勻。
• 洗滌要*。每次洗滌應(yīng)抽凈管內(nèi)液體，應(yīng)盡量將管內(nèi)液體抽干。
• 試劑請?jiān)谟行趦?nèi)使用。
• 標(biāo)本均應(yīng)視為有潛在傳染性，請按傳染病實(shí)驗(yàn)室規(guī)程操作。

前列腺特異抗原(PSA)放免檢測，PSA放免實(shí)驗(yàn)代測